烟酰胺对牛骨骼肌卫星细胞增殖与分化的影响

作者:田向旺; 胡德宝; **林; 郭益文; 李新; 郭宏; 丁向彬*
来源:黑龙江畜牧兽医, 2023, (23): 47-52.
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2023.01.0153

摘要

为了探究烟酰胺(NAM)对牛骨骼肌卫星细胞(BSMSCs)增殖与分化的影响,试验以体外培养的BSMSCs成肌分化模型为研究对象,用0,1,2,4,8 mmol/L烟酰胺处理BSMSCs(对照组及1,2,4,8 mmol/L烟酰胺组),采用CCK-8法筛选烟酰胺对BSMSCs作用的最适浓度,后续试验均以不添加烟酰胺作为对照组,最适浓度作为试验组,采用EdU试剂盒检测最适浓度烟酰胺对BSMSCs增殖的影响;光学显微镜下观察最适浓度烟酰胺处理的BSMSCs分化24,48,72小时时的肌管形态,采用Western-blot检测BSMSCs中肌球重链蛋白(MyHC)和肌原蛋白(MyOG)的表达水平,分析烟酰胺对BSMSCs分化的影响。结果表明:与对照组比较,BSMSCs的OD450值随着烟酰胺浓度的上升而下降,4 mmol/L烟酰胺组OD450值显著降低(P<0.05),8 mmol/L烟酰胺组OD450值极显著降低(P<0.01),但8 mmol/L烟酰胺组的细胞存活率低于50%,超过药物对细胞的半数致死浓度,最终以4 mmol/L作为烟酰胺作用于BSMSCs的最适浓度。4 mmol/L烟酰胺处理BSMSCs后,增殖率没有发生显著变化(P>0.05)。与对照组比较,4 mmol/L烟酰胺组BSMSCs融合形成的肌管数量增多且肌管直径变大,MyHC和MyOG蛋白的相对表达量显著或极显著上升(P<0.05或P<0.01)。说明烟酰胺对BSMSCs增殖没有影响但可促进其分化。

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