摘要
【目的】了解广东省某猪群中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)流行毒株的遗传进化情况,丰富PCV2分子流行病学数据。【方法】使用qPCR方法对疑似PCV2的样品进行检测,检测到了1株具有高病毒载量的PCV2毒株,命名为GD222858。使用PCR方法进行全基因组分子克隆及遗传进化分析。使用MegAlign软件将该毒株ORF1、ORF2基因编码的氨基酸序列与PCV2同亚型参考毒株进行比对,分析氨基酸序列的相似性;DNAStar中的Protean程序预测该毒株的Cap蛋白二级结构及B细胞表位,并与四株疫苗株DBN-SX07-2(HM641752)、LG(HM038034)、SH(HM038027)、ZJ(AY686764)的Cap蛋白抗原指数进行比对分析。【结果】测序结果显示GD222858毒株基因组长度为1767bp。遗传进化树表明该毒株属于PCV2d亚型。与国内外82株参考毒株的核苷酸相似性在91.4%-99.6%,与越南毒株Han8(GenBank登录号:JQ181600)的亲缘关系最近。ORF1编码的Rep蛋白处发现多个特异性突变位点F70Y、F77L、W202R、N256S;ORF2编码的Cap蛋白相对保守。Protean预测Cap蛋白的氨基酸第5-18、24-25、39-41、48-49、57-65、99、101、112-114、139-140、145-150、162-165、175-181、188-189、205-211、227-232位置处均可能存在潜在B细胞表位。GD222858毒株的Cap蛋白抗原指数与4株疫苗株均有差异,在氨基酸45-57、124-132、223-233位置处抗原指数明显高于其它四株疫苗株,且与疫苗株LG(HM038034)差异最大。【结论】该高病毒载量的PCV2毒株为PCV2d亚型,ORF1编码的Rep蛋白处发现多个特异性突变位点F70Y、F77L、W202R、N256S;ORF2编码的Cap蛋白相对保守;B细胞表位处未发现特异性突变;GD222858的Cap蛋白抗原指数分析显示该地区流行毒株与疫苗株LG差异过大。
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