沉默Y盒结合蛋白-1表达抑制SH-SY5Y细胞增殖促其凋亡的作用与机制

作者：王弘; 张坤; 李爽; 迟昨非; 王汝南; 郝良纯

来源：现代肿瘤医学, 2018, 26(01): 13-17.

DOI：10.3969/j.issn.1672-4992.2018.01.004

• Y盒结合蛋白-1
• 短发夹RNA
• 神经母细胞瘤
• 细胞周期蛋白
• 凋亡

目的:观察短发夹RNA(shRNA)沉默Y盒结合蛋白-1(YB-1)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖、凋亡的影响及其调控机制。方法:构建针对YB-1的短发夹RNA真核表达载体,利用LipofectamineTM2000脂质体转染SH-SY5Y细胞,检测蛋白表达水平,鉴别干扰效果;四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测干扰与否对SH-SY5Y细胞增殖的影响;流式细胞技术分析干扰与否对SH-SY5Y细胞凋亡的影响;Western blot法检测CyclinD1、Bcl-2及Bax在蛋白水平的变化。结果:Western blot结果显示转染组YB-1表达低于对照组和无效转染组,后两组无显著差异;MTT法检测显示转染组细胞增殖水平低于对照组,无效转染组细胞增殖水平接近对照组;流式细胞术检测结果显示转染组凋亡细胞数占总细胞数的(23.21±1.90)%,高于对照组(5.05±0.83)%(P<0.01),无效转染组(6.24±1.05)%与对照组无显著性差异(P>0.05);Western blot技术检测转染组CyclinD1、Bcl-2蛋白水平较对照组明显下降,Bax升高,无效转染组同对照组无明显差异。结论:shRNA介导的YB-1表达沉默可抑制SH-SY5Y细胞CyclinD1、Bcl-2表达,促进Bax表达,进而抑制细胞增殖、促进凋亡。

• 单位
  中国医科大学附属盛京医院