含uPA裂解位点的人sTrail融合基因的构建及其原核蛋白表达与纯化

作者：梁宇佳; 缪殿南; 闫国和; 戴晓天; 熊玮

来源：第三军医大学学报, 2011, (08): 789-792.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2011.08.025

• 克隆
• 融合基因
• 融合蛋白
• 抗原性 cloning
• fusion gene
• uPA-sTrail
• antigenicity

目的构建含尿激酶纤溶酶原激活剂(urokinase plasminogen activator,uPA)裂解位点的人可溶性凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand,sTrail)基因的原核载体,表达并纯化其融合蛋白sTrail-uPA。方法 RT-PCR法克隆sTrail基因后,经引物延伸法构建his-uPA-sTrail融合基因并亚克隆至原核表达载体pET-32a中,诱导其表达蛋白并将其纯化,肠肽酶(enterokinase,EK)切与再次纯化回收该蛋白,Western blot检测其抗原性。结果表达载体经诱导成功获约38×103含载体...

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学