细菌荚膜多糖和脂多糖分离及定量方法

作者：郝海滨; 林鸿; 杜德仁; 童智慧; 李维勤^*

来源：中华医院感染学杂志, 2023, 33(22): 3428-3432.

• 脂多糖
• 荚膜多糖
• 分离
• 定量
• 方法

目的 建立一种在不破裂细菌情况下分离、提纯和定量细菌荚膜多糖(CPS)和脂多糖(LPS)的方法，为临床研发细菌多糖疫苗提供选择。方法 以临床感染常见的4种细菌为研究分析对象，乙二胺四乙酸(EDTA)用于分离细菌LPS;3-磺丙基十四烷基二甲甜菜碱(Zwittergent 3-14)用于分离细菌CPS;硫酸-苯酚法用于定量LPS;糖醛酸测定法用于定量CPS;sevage法和无水乙醇纯化LPS和CPS;透射电镜比较处理前后细菌的形态结构；离子色谱仪测定多糖组分。结果 从肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍氏不动杆菌提取的LPS中多糖含量分别是(1.10±0.26)、(1.08±0.10)、(1.34±0.30)μg/109菌量，从肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍氏不动杆菌、金黄色葡萄球菌提取的CPS中糖醛酸含量分别为(13.83±2.31)、(3.35±1.83)、(12.95±4.47)、(6.88±2.09)μg/109菌量。透射电镜显示处理后细胞膜结构完整，菌体未破裂。色谱检测证实分离提取的物质中确实含有CPS和LPS各自常见组分。结论 该方法可以在不破裂细菌条件下，有效分离和定量CPS和LPS。

• 单位
  南京大学