抑制USP22基因对人结直肠癌细胞增殖的影响

作者：王静; 赵成诚; 荣婉

来源：中国现代医学杂志, 2019, 29(21): 14-19.

• 结直肠肿瘤
• 泛素特异性肽酶22
• 细胞增殖
• 细胞周期

目的利用RNA干扰技术探讨泛素特异性肽酶22(USP22)对人结直肠癌细胞增殖的影响。方法免疫荧光检测结直肠癌组织中USP22的表达;Western blotting检测体外培养的HCT-116、SW480、HC-29结直肠癌细胞株中USP22的表达,筛选出表达量最高的细胞作为研究细胞。设计、合成针对USP22特异性siRNA,同时设置阴性对照siRNA,利用脂质体转染结直肠癌细胞后,Western blotting检测siRNA抑制效率;通过MTT法检测细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞的周期及凋亡;Western blotting检测周期相关蛋白CyclinB1、p21、p53、CDK2的表达。结果结直肠癌组织中USP22表达量与癌旁组织比较,差异有统计学意义(P <0.05),结直肠癌组织中USP22表达量升高。SW480细胞中USP22的表达量最高,因此作为靶细胞进行后续研究。与对照组比较,USP22 siRNA能够降低USP22的表达(P<0.05)。USP22抑制后,与对照组比较,能够抑制SW480细胞的增殖,促使SW480细胞停滞于G0/G1期,抑制细胞周期进程,增加细胞凋亡率(P<0.05),进而抑制细胞增殖(P<0.05);同时,与对照组比较,CyclinB1、CDK2的表达量降低(P <0.05),p53和p21的表达量升高(P <0.05)。结论 USP22抑制后,能够抑制结直肠癌细胞的增殖,其机制可能与抑制细胞周期进程、促进细胞凋亡有关。

• 单位
  武汉生物工程学院