摘要

目的:探讨补肾活血法对类风湿关节炎(RA)软骨细胞焦亡的影响及其分子机制。方法:取胶原诱导型关节炎小鼠膝关节软骨进行体外细胞培养,予补肾活血法的代表方断藤益母汤低中高剂量进行干预。CCK8法检测软骨细胞活力,微板法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放,TUNEL法检测细胞焦亡,RT-PCR法检测caspase-1、IL-1β、IL-18 RNA表达情况,Western Blot法检测HMGB1、NLRP3蛋白表达水平。结果:断藤益母汤冻干粉稀释液在6、12、24μg/mL的浓度下对RA软骨细胞的活力没有明显的影响。与空白组比较,断藤益母汤各剂量组均可不同程度地抑制RA软骨细胞LDH释放和caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。空白组RA软骨细胞细胞核浓缩,TUNEL染色明显呈阳性,细胞焦亡明显。经断藤益母汤干预后,RA软骨细胞发生焦亡比率明显减少(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,断藤益母汤可显著抑制RA软骨细胞HMGB1、NLRP3蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾活血法能减轻RA软骨细胞焦亡,其机制可能与抑制HMGB1/NLRP3信号通路有关。