miR-503靶向作用RECK调控口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和凋亡的机制研究

作者：周新谊; 叶涛; 邱凤美^*

来源：口腔颌面外科杂志, 2023, 33(05): 305-313.

• miR-503
• 回复引导半胱氨酸丰富蛋白Kazal基元
• 靶向调控
• 口腔鳞状细胞癌
• 增殖
• 侵袭
• 凋亡

目的：通过研究miR-503靶向回复引导半胱氨酸丰富蛋白Kazal基元(reversion inducing cysteine rich protein with Kazal motifs,RECK)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)进展中的作用。方法：将人OSCC细胞SCC-4分为NC inhibitor组(转染miR-503 inhibitor阴性对照序列)、miR-503 inhibitor组(转染miR-503 inhibitor)、si-NC组（转染RECK siRNA阴性对照序列）、si-RECK组(转染RECK siRNA)、miR-503 inhibitor+si-NC组（共转染miR-503 inhibitor和RECK siRNA阴性对照序列）和miR-503 inhibitor+si-RECK组(共转染miR-503 inhibitor和RECK siRNA)。实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）检测miR-503和RECK在各组SCC-4细胞及永生化人口腔角质形成细胞RT7中的表达；Western blotting检测RECK蛋白的表达；TargetScan预测miR-503的靶基因并通过双荧光素酶报告基因检测来验证miR-503与RECK的靶向关系；CCK-8和EdU染色检测各组细胞的增殖能力；Transwell小室检测细胞侵袭能力；流式细胞术检测各转染组细胞凋亡情况。结果：相比RT7细胞，miR-503在SCC-4细胞中高表达（P<0.05）,RECK则呈低表达（P<0.05）；与NC inhibitor组相比，miR-503 inhibitor组细胞中RECK mRNA及RECK蛋白的表达水平均显著升高（P<0.05）;TargetScan数据库及荧光素酶报告基因分析显示了RECK和miR-503之间的靶向关系（P<0.01），提示miR-503可靶向抑制RECK的表达；与NC inhibitor组相比，miR-503 inhibitor组SCC-4细胞的增殖能力、侵袭能力均显著下降（P<0.05），而细胞的凋亡则显著增加（P<0.01），抑制miR-503表达降低了OSCC细胞的增殖、侵袭并加速凋亡；与si-NC组相比较，si-RECK组细胞增殖、侵袭能力均显著增加（P<0.05），而细胞凋亡能力显著下降（P<0.05），敲低RECK增加了OSCC细胞的增殖、侵袭并降低凋亡；与miR-503 inhibitor+si-NC组相比较，miR-503 inhibitor+si-RECK组细胞中RECK mRNA的表达水平和细胞凋亡能力均显著下降（P<0.05），细胞增殖、侵袭能力显著增加（P<0.05），敲低RECK可削弱miR-503 inhibitor对OSCC细胞生物学行为的抑制作用。结论：miR-503在OSCC细胞中表达上调，抑制miR-503可削弱其对靶基因RECK的下调，从而降低肿瘤细胞的增殖与侵袭能力，并促进细胞的凋亡。

• 单位
  荆门市第二人民医院