ERK1/2抑制对沙门菌侵袭小鼠胃癌细胞后小鼠β-防御素-2表达的影响

作者：范影; 张柏宁; 赵鹏伟; 张坤

来源：中国生物制品学杂志, 2017, 30(11): 1131-1139.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.001990

• ERK1/2
• 沙门菌
• 小鼠胃癌细胞
• 小鼠β-防御素-2

目的探讨ERK1/2抑制对沙门菌侵袭小鼠胃癌(mouse forestomach carcinoma,MFC)细胞后小鼠β-防御素-2(mouseβ-defensin-2,m BD-2)表达的影响及作用机制。方法采用RNA干扰的方法抑制MFC细胞中ERK1/2的表达,并经G418筛选稳定细胞株,经RT-PCR和Western blot法检测ERK1/2基因的抑制效率。用103个/ml的沙门菌对干扰组及对照组(未转染)的MFC细胞分别作用4、8及12 h,通过Western blot法检测m BD-2蛋白表达及Rsk90的磷酸化水平。同时采用MTT法检测沙门菌作用两组MFC细胞12、24及48 h时的生长情况。结果RT-PCR和Western blot法检测结果表明,ERK1/2基因抑制效果显著。沙门菌作用MFC细胞后4、8和12 h后,各时间点间干扰组细胞中m BD-2蛋白表达及Rsk90蛋白磷酸化水平差异无统计学意义(P>0.05),且均显著低于各时间点的对照组(P<0.05)。沙门菌作用12和24 h,干扰组细胞的抑制率明显高于对照组(P<0.05),作用48 h时,两组细胞的抑制率差异无统计学意义(P>0.05),细胞几乎全部死亡,且干扰组细胞抑制率的增加速度较快,作用24 h时已达97.7%。结论ERK1/2抑制可明显降低沙门菌侵袭MFC后m BD-2的表达水平,表明ERK1/2可调控m BD-2的表达。

• 单位
  内蒙古医科大学; 内蒙古自治区人民医院; 内蒙古医科大学第二附属医院; 基础医学院