白细胞介素1受体1和白细胞介素6双基因敲除小鼠的构建及基因型鉴定

作者：范海涛; 李恒; 郭磊; 王晶晶; 储曼曼; 黄星; 郑惠文; 杨泽宁; 李洪哲; 刘龙丁^*

来源：国际免疫学杂志, 2018, 41(03): 251-255.

• 白细胞介素-1受体1
• 白细胞介素-6
• 基因敲除小鼠
• 基因型鉴定

目的通过白细胞介素1受体1 (interleukin-1 receptor1, IL-1R1)和白细胞介素6 (interleukin-6, IL-6)单基因敲除小鼠杂交繁育以获得IL-1R1-/-IL-6-/-纯合子小鼠。方法将IL-1R1+/+IL-6-/-和IL-1R1-/-IL-6+/+小鼠杂交, 并进行子代自交繁殖, 提取基因组DNA, PCR鉴定其自交子代基因型。并用免疫印迹法(Western blot)、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)确定自交小鼠后代基因型。结果 PCR鉴定成功获得基因型为IL-1R1-/-IL-6-/-的双基因敲除小鼠。Western blot结果显示, 双基因敲除小鼠未见IL-1R1的蛋白条带;ELISA结果提示, 双基因敲除小鼠的IL-6细胞因子为阴性。结论成功获得IL-1R1-/-IL-6-/-双基因敲除纯合小鼠, 为深入研究IL-1R1、IL-6基因相关的炎症疾病动物模型奠定基础。

• 单位
  中国医学科学院医学生物学研究所; 昆明医科大学