摘要
目的探讨T-box3基因(TBX3)对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响, 并初步探讨其机制。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白印迹(Western blot)方法检测结肠癌患者及结肠癌细胞株TBX3的mRNA和蛋白表达。培养结肠癌SW620细胞株并进行干预, 分为小干扰RNA(siRNA)-TBX3转染组、siRNA-对照组转染组、空白组。转染48 h后噻唑蓝(MTT)实验检测SW620细胞活性, 流式细胞术检测细胞凋亡。RT-qPCR和Western blot检测各组细胞增殖、凋亡相关基因、蛋白表达。结果结肠癌患者肿瘤组织TBX3 mRNA和蛋白相对表达水平显著高于癌旁组织(3.77±0.92、0.66±0.14比0.90±0.22、0.18±0.03, t=25.02、28.21, P<0.01);结肠癌SW620细胞株TBX3 mRNA和蛋白相对表达水平显著高于HIEC(3.01±0.44、0.92±0.06比1.15±0.17、0.24±0.03), 差异均有统计学意义(t=9.68、24.08, P<0.01)。siRNA-TBX3转染组SW620细胞活性明显低于siRNA-对照组、空白组(0.46±0.13、1.12±0.07、1.16±0.10, F=89.45, P<0.01);siRNA-TBX3转染组SW620细胞凋亡率明显高于siRNA-对照组、空白组[(23.09±4.59)%、(6.82±0.92)%、(7.22±1.75)%, F=31.01, P<0.01]。siRNA-TBX3转染组TBX3、增殖细胞核抗原(PCNA)、B细胞淋巴瘤(bcl-2)表达明显低于siRNA-对照组、空白组(mRNA:F=34.69、10.15、25.47, P<0.01;蛋白:F=57.56、23.10, P<0.01);siRNA-TBX3转染组bcl-2相关X蛋白(bax)、半胱天冬酶-3(Caspase-3)表达明显高于于siRNA-对照组、空白组(mRNA:F=25.17、27.79, P<0.01;蛋白:F=19.91、9.01, P<0.05);siRNA-TBX3转染组P14ARF/P53途径中P14ARF、P53蛋白表达明显低于siRNA-对照组、空白组(F=25.23、20.06, P<0.01)。结论结肠癌肿瘤组织TBX3高表达, 抑制TBX3表达可抑制结肠癌细胞增殖、促进细胞凋亡, 其机制可能与下调P14ARF/p53途径有关。
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单位河北医科大学第二医院