栝楼桂枝汤调控TLR3通路对小胶质细胞活化诱导的神经细胞损伤的保护作用研究

作者：胡海霞^*; 钟兴华; 林心君; 朱晓勤

来源：中国医院药学杂志, 2023, 1-9.

• 栝楼桂枝汤
• 小胶质细胞
• TLR3信号通路
• 炎症反应
• 神经细胞
• 凋亡

目的：探讨栝楼桂枝汤通过TLR3（toll-like receptor 3）信号通路抑制小胶质细胞活化介导的炎症反应发挥神经细胞保护作用的分子机制。方法：栝楼桂枝汤预处理后，分别使用LPS刺激BV2细胞建立炎症模型和BV2细胞的条件性培养基（microglia-conditioned media， MCM）干预HT22细胞制备神经细胞损伤模型。CCK8（cell counting kit-8）法测定细胞活力；ELISA法检测细胞培养上清中的细胞因子；通过免疫荧光实验检测TLR3及TRIF（toll/interleukin receptor domain-containing adaptor-inducing IFNβ）蛋白的表达情况；采用DNA-binding ELISA法检测转录因子IRF3（interferon regulatory factor 3）的活化水平；细胞TLR3 siRNA（small interfering RNA）转染实验验证栝楼桂枝汤的作用靶点；采用Western-Blotting法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达水平；采用Caspase-9活性测定法测定其活性。结果：栝楼桂枝汤可显著减轻MCM诱导的HT22细胞损伤，并上调LPS刺激的BV2细胞上清中IFN-β的含量，下调IL-8的含量。同时，栝楼桂枝汤显著增加TLR3通路相关蛋白的表达水平并促进IRF3的活化水平，且敲低TLR3表达后，栝楼桂枝汤对抗炎因子IL10无促进作用。此外，栝楼桂枝汤可使经MCM干预后HT22细胞的Bcl-2表达增加，Bax表达下降，Caspase-9活性降低。结论：栝楼桂枝汤可能通过激活TLR3信号通路调节小胶质细胞活化后的炎症反应，抑制神经细胞凋亡，进而缓解神经细胞损伤。

• 单位
  福建中医药大学