沉默PRKCD通过调控上皮-间质转化抑制肝癌Huh-7细胞的增殖和侵袭

作者：张懿刚; 孟海萍; 徐之端; 赵向阳; 江博文; 谈燚^*

来源：右江民族医学院学报, 2023, 45(03): 406-412.

• 蛋白激酶C
• 肝肿瘤
• 癌,肝细胞
• 上皮-间质转化

目的 探讨蛋白激酶Cδ(protein kinase Cδ,PRKCD)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中的表达水平、临床意义及其潜在的作用机制。方法 从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas, TCGA)数据库中下载HCC的表达数据和临床数据，分析PRKCD在HCC中的表达水平及其临床意义。收集25例HCC患者的肿瘤组织及癌旁组织，采用免疫组化染色检测患者样本中的PRKCD蛋白表达水平。采用Western Blot及qRT-PCR法检测PRKCD在正常肝上皮细胞和肝癌细胞系中的表达水平。通过构建si-PRKCD慢病毒转染到Huh-7肝癌细胞中，采用CCK-8实验评估沉默PRKCD对肝癌细胞增殖活性的影响。采用划痕实验、Transwell侵袭实验明确PRKCD对细胞迁移和侵袭的影响。最后，通过Western Blot法检测PRKCD对上皮-间质转化(epithelial to mesenchymal transition, EMT)关键蛋白(Vimentin、N-cadherin、E-cadherin、Slug)的内在调控作用。结果 TCGA数据库分析及免疫组化染色结果显示，肝癌组织中PRKCD的表达量显著高于癌旁组织(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线分析显示PRKCD低表达患者的总生存率(overall survival, OS)、无病间隔期(disease-free interval, DFI)、无病生存期(disease-free survival, DFS)显著高于PRKCD高表达患者。与正常肝上皮细胞LO2相比，PRKCD在肝癌细胞Huh-7中的蛋白表达水平最高(P<0.05)。与对照组比较，沉默PRKCD后，PRKCD蛋白表达量显著减少(P<0.05)。肝癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力明显降低(P<0.05)。此外，沉默PRKCD后，Vimentin、N-cadherin、Slug蛋白表达降低，而E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。结论 PRKCD是肝癌的潜在不良预后标志物，沉默PRKCD的表达能够抑制Huh-7肝癌细胞的增殖和侵袭，其机制可能与上皮-间质转化过程有关。

• 单位
  蚌埠医学院第一附属医院