HDACs在斑马鱼视网膜再生中的作用研究

作者：陆颖; 陈琪; 张书强; 胡楠; 徐绘^*

来源：南通大学学报(医学版), 2020, 40(04): 295-299.

DOI：10.16424/j.cnki.cn32-1807/r.2020.04.001

• 组蛋白去乙酰化酶
• 斑马鱼
• 视网膜
• 再生
• Müller细胞

目的 :探究组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases, HDACs)在斑马鱼视网膜针刺损伤后的表达及其在视网膜再生中的作用。方法:(1)通过定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction, qPCR)检测视网膜损伤后HDACs的mRNA表达水平;(2)5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2′-deoxyuridine, BrdU)免疫荧光分析视网膜Müller细胞(Müller glia, MG)和祖细胞(MG-derived progenitor cells, MGPCs)的增殖;(3)利用在去分化MG中特异表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)的Tg(1016tuba1a:GFP)转基因斑马鱼检测MG细胞的去分化;(4)通过BrdU谱系追踪MGPCs并进行增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)免疫荧光分析MGPCs的细胞周期进程;(5)qPCR检测抑制HDACs后视网膜内细胞周期相关基因的表达变化。结果:(1)视网膜损伤后多个hdac基因表达发生改变;(2)使用HDACs抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A, TSA)或丙戊酸(valproic acid, VPA)均显著抑制损伤后第4天MGPCs的形成;(3)HDACs不参与MG的去分化,但MG的增殖需要HDACs;(4)抑制HDACs显著影响了MGPCs的细胞周期进程和细胞周期相关基因表达。结论:HDACs促进视网膜损伤后MG和MGPCs的增殖,在自发性视网膜再生中发挥必要作用。

• 单位
  南通大学; 生命科学学院; 南通大学附属医院