油莎豆原生质体制备的组织筛选及条件优化

作者：张向歌; 朱雅婧; 陆莉莉; 宋万献; 张新友; 胡海燕; 于美琴; 李居政; 王会伟^*

来源：河南农业科学, 2023, 52(12): 49-56.

DOI：10.15933/j.cnki.1004-3268.2023.12.006

• 油莎豆
• 原生质体制备
• 组织筛选
• 酶解条件
• 优化
• 种质创新

为高效获得油莎豆原生质体，采用单因素试验方法进行油莎豆原生质体制备的组织部位（幼芽、幼根、幼叶、幼叶鞘、分蘖节和匍匐茎）筛选以及酶解条件（酶组合用量、酶解时间、渗透压稳定剂用量和酶液pH值）优化。结果表明，油莎豆原生质体制备的最佳组织部位为幼嫩的分蘖节；最优酶解条件：酶组合用量为2.0%纤维素酶+0.9%离析酶、酶解时间为6 h、渗透压稳定剂甘露醇用量为11%、酶液pH值为6.0。此条件下，0.2 g油莎豆幼嫩分蘖节加至4 mL酶液中，原生质体的产量可达22.91×105个/g，活力可达90.72%。综上，获得了高效制备油莎豆原生质体的方法，可为后续油莎豆原生质体融合、种质创新以及杂交育种奠定基础。

• 单位
  河南省农业科学院