基于Wnt/β-catenin信号通路研究臭壳虫与环磷酰胺联合用药对肺癌细胞增殖和凋亡的影响及机制

作者：闫靖楠; 马科^*; 刘文杰; 林莹; 李秀育; 吴丹

来源：中国中药杂志, 2023, 48(20): 5603-5611.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20230712.701

• 臭壳虫
• 环磷酰胺
• 肺癌
• 增殖
• 凋亡
• Wnt/β-catenin信号通路

研究臭壳虫与环磷酰胺单独以及联合用药对肺癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。选择SD大鼠制备臭壳虫和环磷酰胺含药血清与空白血清，采用细胞增殖与活性检测细胞计数试剂(cell counting kit-8,CCK-8)法检测臭壳虫与环磷酰胺含药血清单独以及联合用药对肺癌细胞株A549和Lewis细胞增殖的影响，金式公式法评价药物联用效应，根据评价结果选择合适的药物浓度与肺癌细胞株用于后续实验。实验分组为对照组、臭壳虫组、环磷酰胺组、联合组、臭壳虫+Wnt/β-catenin通路激动剂氯化锂(LiCl)组，采用免疫细胞化学法检测不同组别药物干预后Lewis细胞中增殖相关蛋白的表达情况；流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡情况；同时采用蛋白免疫印迹法检测细胞中PCNA、cyclinD1、Bcl-2、Bax和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平。结果显示，臭壳虫与环磷酰胺单独及联合用药均能显著抑制A549和Lewis肺癌细胞增殖，与单独用药相比，联合用药能够进一步升高对细胞增殖的抑制率，且通过金氏公式评价得知臭壳虫与环磷酰胺联合用药具有协同效应。与对照组相比，臭壳虫组、环磷酰胺组及联合组Lewis细胞G0/G1期比例、凋亡率及Bax蛋白表达均显著升高，PCNA、cyclinD1、Bcl-2、Wnt1及β-catenin蛋白表达均显著降低；与环磷酰胺组相比，联合组细胞G0/G1期比例、凋亡率及Bax蛋白表达进一步增加，PCNA、cyclinD1、Bcl-2、Wnt1及β-catenin蛋白表达进一步降低；与臭壳虫组相比，臭壳虫+LiCl组细胞G0/G1期比例、凋亡率及Bax蛋白表达显著降低，PCNA、cyclinD1、Bcl-2、Wnt1及β-catenin蛋白表达显著升高。结果表明，臭壳虫可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制肺癌细胞增殖，阻滞细胞周期，并诱导其凋亡，且与环磷酰胺联合用药具有协同效应。

• 单位
  宁夏医科大学