ROS在乳化异氟醚后处理激活大鼠心肌细胞Nrf2/ARE信号通路中的作用

作者：陈熙媛; 徐鹏; 陈伟; 王海英^*; 李小娟; 喻田

来源：中华麻醉学杂志, 2018, 38(05): 622-626.

• 活性氧
• 异氟醚
• 脂肪乳剂,静脉注射用
• NF-E2相关因子2
• 反应元件
• 心肌再灌注损伤

目的评价活性氧(ROS)在乳化异氟醚后处理激活大鼠心肌细胞转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路中的作用。方法原代培养大鼠心肌细胞,采用随机数字表法分为4组(n=20):对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组)、乳化异氟醚后处理组(EIP组)、乳化异氟醚后处理+ROS清除剂N-2-巯基丙酰-甘氨酸(MPG)组(EIP+MPG组)。采用混合气体培养法制备心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。EIP组缺氧45 min时加入乳化异氟醚(终浓度1.68mmol/L),孵育5 min,随后复氧60 min;EIP+MPG组于乳化异氟醚孵育5 min时加入MPG(终浓度2mmol/L),孵育10 min,其余步骤同EIP组。于复氧末观察心肌细胞超微结构,行线粒体损伤评分;测定细胞内游离Ca2+水平及Nrf2活性;采用RT-PCR法及Western blot法分别检测Nrf2及血红素加氧酶-1(HO-1)、超氧化物歧化酶1(SODI)、醌氧化还原酶(NQO1)的mRNA及蛋白表达水平。结果与C组比较,其余3组线粒体损伤评分和细胞内游离Ca2+水平升高,Nrf2活性增强,Nrf2、HO-1、SOD1及NQO1及其mRNA表达下调(P<0.05);与H/R组比较,EIP组与EIP+MPG组线粒体损伤评分和细胞内游离Ca2+水平降低,Nrf2活性增强,Nrf2、HO-1、SOD1及NQO1及其mRNA表达上调(P<0.05),心肌细胞病理学损伤减轻;与EIP组比较,EIP+MPG组线粒体损伤评分和细胞内游离Ca2+水平升高,Nrf2活性减弱,Nrf2、HO-1、SOD1及NQO1及其mRNA表达下调(P<0.05),心肌细胞病理学损伤加重。结论乳化异氟醚后处理激活大鼠心肌细胞Nrf2/ARE信号通路的机制可能与ROS有关。

• 单位
  遵义医学院附属医院; 湘潭市中心医院