重组人神经生长因子腺相关病毒载体的构建及病毒滴度的测定

作者：刘相萍; 罗文娟; 杨堃; 隋爱华; 吕振华; 王传富

来源：眼科新进展, 2007, (10): 728-731.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2007.10.031

• 神经生长因子
• 基因克隆
• 腺相关病毒
• 病毒滴度
• 角膜 nerve growth factor
• gene cloning
• adeno-associated virus
• titer
• cornea

目的克隆人神经生长因子-β(nerve growth factor-β,NGF-β)基因,重组于腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)载体,构建表达人NGF-β的重组腺相关病毒,检测滴度,为NGF-β的真核表达及临床应用提供实验基础。方法从正常人基因组中扩增出人NGF-β全长开放读框,将其克隆于pAAV-MCS载体,双酶切和测序鉴定重组病毒载体。将该质粒与腺相关病毒包装质粒(pAAV-RC)、腺相关病毒辅助质粒(pAAV-Helper)共转染AAV-293细胞,通过包装得到重组腺相关病毒并回收病毒原液。以pAAV-LacZ和pAAV-RC、pHelper共转染AAV...

• 单位
  青岛大学医学院附属医院