摘要
目的:探讨LINC00460对皮肤鳞状细胞癌(CSCC)细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及可能机制。方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析人类永生化表皮细胞(HaCaT)和CSCC细胞(SCC13、A431和HSC-5)中LINC00460和miR-380-3p的表达水平。将LINC00460小干扰RNA(si-LINC00460)、miR-380-3p模拟物(miR-380-3p mimics)、si-LINC00460+miR-380-3p抑制物(anti-miR-380-3p)分别转染A431细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力,流式细胞术分析细胞凋亡,Transwell实验分析细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印记(Western blot)检测细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、上皮细胞钙黏蛋白(E-Cadherin)、神经钙黏蛋白(N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达。双荧光素酶报告基因实验、RT-qPCR确定LINC00460对miR-380-3p的靶向调控作用。结果:与HaCaT比较,CSCC细胞中LINC00460表达显著增加,miR-380-3p表达显著降低(P<0.05)。下调LINC00460表达后A431细胞增殖活力、迁移和侵袭细胞数以及CyclinD1、MMP2、MMP9、N-Cadherin和Vimentin蛋白表达显著降低(P<0.05),凋亡率、E-Cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。上调miR-380-3p表达后A431细胞增殖活力、迁移和侵袭细胞数以及CyclinD1、MMP2和MMP9表达显著降低(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05)。与下调LINC00460比较,同时下调LINC00460和miR-380-3p后A431细胞增殖活力、迁移和侵袭细胞数以及CyclinD1、MMP2、MMP9、N-Cadherin和Vimentin蛋白表达显著升高(P<0.05),凋亡率、E-Cadherin蛋白表达显著降低(P<0.05)。LINC00460靶向负调控miR-380-3p表达。结论:CSCC细胞中LINC00460表达增加,下调LINC00460能够降低CSCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力,诱导细胞凋亡,其机制与靶向调控miR-380-3p表达有关。
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单位沈阳市第七人民医院