牛膝多糖通过Notch1通路影响骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化的机制

作者：岳宗进; 刘汝银^*; 于露; 王新立; 徐向阳

来源：西安交通大学学报（医学版）, 2022, 43(04): 600-606.

• 骨髓间充质干细胞
• 髓核样细胞
• 细胞分化
• 牛膝多糖
• Notch1通路

目的探讨牛膝多糖(achyranthes bidentata polysaccharides,ABPS)对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向髓核样细胞分化的影响及机制。方法 取5只4周龄SD大鼠，处死后解剖分离BMSCs，反复贴壁纯化，取第3代BMSCs，不同浓度ABPS作用48 h,MTT法检测细胞存活率，选择对BMSCs生长无毒性的ABPS最高浓度进行后续实验。根据处理方式不同将细胞分为对照组(常规培养)、ABPS组(200 mg/L ABPS)、Notch1组(转染Notch1)、Notch1阴性对照组(转染Notch1阴性对照)和ABPS+Notch1组(转染Notch1后加入200 mg/L ABPS)。诱导培养14 d后MTT法检测细胞增殖能力，qPCR和Western blotting分别检测collagenⅡ、聚集蛋白聚糖(aggrecan)、Notch1、Hes1 mRNA和蛋白表达水平，取第1、4、7、10、14天细胞培养基阿尔新蓝法检测葡糖胺聚糖(GAG)。结果400 mg/L ABPS作用BMSCs 48 h，细胞存活率与对照组比较显著降低(P<0.05)，浓度≤200 mg/L时，ABPS对BMSCs生长无明显毒性作用，选择200 mg/L ABPS进行后续实验。诱导培养14 d后，与对照组比较，ABPS组细胞A值、培养基内GAG含量、collagenⅡ、aggrecan mRNA和蛋白相对表达量升高，Notch1、Hes1 mRNA和蛋白相对表达量降低；而Notch1组细胞A值、培养基内GAG含量、collagenⅡ、aggrecan mRNA和蛋白相对表达量降低，Notch1、Hes1 mRNA和蛋白相对表达量升高(P<0.05);ABPS+Notch1组可部分逆转过表达Notch1对BMSCs向髓核样细胞分化的抑制作用。结论 ABPS可以促进BMSCs向髓核样细胞分化，作用机制可能与抑制Notch1通路有关。

• 单位
  河南中医药大学; 河南省中医院