一氧化碳释放分子2调控T淋巴细胞分化介导抗炎保护失血性休克大鼠肠屏障

作者：牛庆晟; 张瑞; 陈磊; 王晓红^*

来源：中华急诊医学杂志, 2022, 31(05): 628-635.

• 一氧化碳释放分子2
• 休克
• 肠
• 淋巴细胞
• 炎症

目的探讨一氧化碳释放分子2(carbon monoxide-releasing molecule-2, CORM-2)调控T淋巴细胞的分化介导抗炎保护失血性休克大鼠肠屏障。方法 56只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、休克组、二甲基亚砜组(dimethyl sulfoxide, DMSO)、灭活型一氧化碳释放分子2组(inactive carbon monoxide-releasing molecule-2, iCORM-2)、CORM-2 2 mg/kg组、CORM-2 4 mg/kg组及CORM-2 6 mg/kg共7组, 每组8只。采用Wiggers改良法制备失血性休克大鼠模型, CORM-2各剂量组和iCORM-2组于制备休克模型前即刻腹腔注射不同剂量CORM-2和6 mg/kg iCORM-2, DMSO组腹腔注射与iCORM-2等量的2%DMSO, 休克组和假手术组不给予药物干预。各组大鼠记录置管后或休克后不同时相平均动脉压变化。各组大鼠造模成功后23 h采用荧光素异硫氰酸酯(fliorescein isothiocyanate, FITC)-葡聚糖作为渗透性标记物测试肠壁通透性, 并留取回肠组织观察肠道病理形态。免疫组化观察大鼠肠黏膜淋巴细胞转录因子T-bet、Foxp3的表达, Western Blot检测大鼠肠黏膜组织干扰素-γ(interferon-γ, IFN-γ)、白介素10(interleukin-10, IL-10)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)的表达。正态分布计量资料多组间均数比较采用单因素方差分析, 非正态分布数据采用Kruskal Wallis秩和检验。结果与假手术组相比, 休克组、DMSO组和iCORM-2组血清中FITC-葡聚糖浓度明显增加(均P<0.05);与休克其余各组比较, CORM-2各剂量组血清中FITC-葡聚糖浓度均减低(均P<0.05)。病理学改变显示休克组、DMSO组和iCORM-2组大鼠回肠组织损伤明显;CORM-2干预可减轻休克大鼠回肠黏膜损伤, 且CORM-2 4 mg/kg组和CORM-2 6 mg/kg组回肠结构更完整。休克组和DMSO组肠黏膜淋巴细胞T-bet抗原表达较假手术组升高(均P<0.05);CORM-2各剂量组T-bet抗原表达较休克组降低(均P<0.05)。CORM-2 2 mg/kg组、CORM-2 4 mg/kg组及iCORM-2组Foxp3抗原表达较休克组和DMSO组均减低(均P<0.05), 但CORM-2 6 mg/kg组与休克组或DMSO组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。与假手术组相比, 休克组IFN-γ表达升高(P<0.05), IL-10和TGF-β表达未见差异(均P>0.05);与休克组相比, CORM-2各剂量组IL-10蛋白表达升高(均P<0.05), 其中CORM-2 4 mg/kg组和CORM-2 6 mg/kg组TGF-β表达上调(均P<0.05), 但仅CORM-2 6 mg/kg组较休克组IFN-γ表达下调(P<0.05)。结论 CORM-2可抑制1型辅助性T细胞的活化, 降低炎症因子, 增加抗炎因子, 减轻休克缺血肠壁炎症, 保护肠屏障。

• 单位
  宁夏医科大学; 宁夏医科大学总医院