摘要
目的 探讨石斛碱(DNLA)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法 原代分离培养人膝关节软骨细胞,采用IL-1β诱导软骨细胞建立细胞损伤模型,不同剂量DNLA作用于软骨细胞;CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡率;qRT-PCR检测miR-155-5p表达量;anti-miR-NC、anti-miR-155-5p分别转染至软骨细胞后用IL-1β处理细胞,miR-NC、miR-155-5p mimics分别转染至软骨细胞后用DNLA、IL-1β共同处理细胞;Western blot检测增殖(Ki-67、PCNA)、凋亡(cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9)相关蛋白表达量。结果 IL-1β作用条件下,不同剂量DNLA可降低细胞增殖抑制率、细胞凋亡率及cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9蛋白水平(P<0.05),并可降低miR-155-5p表达量(P<0.05),Ki-67、PCNA蛋白水平升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;转染anti-miR-155-5p可降低IL-1β诱导的软骨细胞增殖抑制率、凋亡率、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9蛋白水平(P<0.05),Ki-67、PCNA蛋白水平升高(P<0.05);转染miR-155-5p mimics可拮抗DNLA对IL-1β诱导的软骨细胞增殖、凋亡的作用。结论 DNLA可减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤,其机制与抑制miR-155-5p表达而促进细胞增殖及抑制细胞凋亡有关。
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单位武汉科技大学; 湖北文理学院; 华中科技大学同济医学院附属协和医院; 襄阳市中心医院