大鼠成骨细胞特异单链DNA适配体的筛选与鉴定

作者：李慧; 丁红梅; 李洁; 黄皑雪; 苏雪婷; 梁超; 张令强; 赵强; 李少华; 邵宁生

来源：生物技术通讯, 2015, 26(01): 81-84.

• 大鼠成骨细胞
• DNA文库
• 适配体
• SELEX筛选
• 鉴定

目的:筛选能特异识别大鼠成骨细胞的单链DNA(ssDNA)适配体并对其进行鉴定。方法:利用完整细胞为靶标的消减细胞SELEX技术筛选大鼠成骨细胞特异ssDNA适配体,通过荧光显微镜、流式细胞术、基因克隆测序、MEME在线软件和RNA structure分析软件,分析适配体的一、二级结构,并对筛选得到的适配体进行鉴定。结果:经过6轮消减细胞SELEX筛选,荧光显微镜鉴定文库已富集;通过流式细胞术检测及测序分析,得到2条适配体L54和L66与大鼠成骨细胞特异结合,其平衡解离常数分别为494.4±133.3和511.4±160.7 nmol/L。结论:筛选获得特异识别大鼠成骨细胞的ssDNA适配体。

• 单位
  军事医学科学院放射与辐射医学研究所; 军事医学科学院基础医学研究所