新型布尼亚病毒环介导等温扩增可视化检测方法的建立

作者：吕恒; 钟璟浩; 张锦海; 王平; 王长军

来源：中国病原生物学杂志, 2016, 11(03): 225-228.

DOI：10.13350/j.cjpb.160307

• 新型布尼亚病毒(SFTSV)
• 可视化检测
• 环介导等温扩增(LAMP)
• 羟基萘酚蓝(HNB)

目的应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立新型布尼亚病毒(SFTSV)可视化快速检测方法。方法针对新型布尼亚病毒的S片段基因设计LAMP引物建立LAMP方法。反应体系内加入染料羟基萘酚蓝(HNB)作为反应扩增指示剂,根据LAMP浊度仪扩增结果优化反应条件,根据HNB颜色变化进行结果判定,评估LAMP方法的特异性和灵敏性。结果建立的LAMP方法最低检出限为10拷贝/反应管;方法的特异性高,仅SFTSV反应管颜色由紫罗兰变为天蓝色,而汉坦病毒、新疆出血热、Q热、马尔堡、埃博拉病毒及阴性对照反应管均未发生变色反应;LAMP反应的最佳温度为63℃,其扩增效率高于常规PCR,试验过程仅需30min。结论建立的可视化SFTSV LAMP检测方法具有特异性强,灵敏性高,实验设备要求简单等优点,可用于SFTSV的快速检测。