PCR法扩增NOGO基因RNA干涉小发夹和体外效应研究

作者：孙红辉; 白云深; 王东生; 杨有庚

来源：中国老年学杂志, 2006, (06): 798-799.

DOI：10.3969/j.issn.1005-9202.2006.06.038

• 脊髓损伤
• RNA干涉
• 基因治疗
• 聚合酶链式反应

目的通过PCR方法获得带有U6启动子的NOGO基因RNA干涉小发夹。方法设计特异性引物,人工合成U6启动子的上游引物和带有NOGO-66反相互补序列的下游引物。PCR扩增带有U6启动子的小发夹,PCR产物与载体连接。酶切产物以1%琼脂糖凝胶进行电泳分析,释放出430bp基因片段的质粒初步确定为阳性重组质粒,并测序。结果成功地扩增了靶向NOGO基因RNAi的带有U6启动子的小发夹。结论PCR方法可快速简单、廉价地获得shRNA。

• 单位
  吉林大学第二医院