甘珀酸增强RSL3对耐顺铂睾丸癌细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用

作者：杜家如; 李彬; 朱晨露; 韩家乐; 童旭辉^*

来源：南方医科大学学报, 2022, 42(03): 405-410.

• 睾丸癌
• RSL3
• 甘珀酸
• 增殖
• 侵袭
• 迁移
• 铁死亡

目的 探讨铁死亡诱导剂RSL3对耐顺铂睾丸癌细胞(I-10/DDP)增殖、侵袭和迁移能力的影响以及甘珀酸对RSL3抗耐药睾丸癌活性的作用。方法 MTT法检测不同浓度RSL3(0、1、2、4、8、16、32μmol/L)及合用甘珀酸(100μmol/L)作用后I-10/DDP细胞的存活率、铁死亡抑制剂Fer-1(2μmol/L)的作用下RSL3(4μmol/L)及甘珀酸(100μmol/L)合用RSL3(4μmol/L)处理后I-10/DDP细胞的存活率。后续实验分为Control组、甘珀酸(100μmol/L)组、RSL3(2μmol/L)组、甘珀酸(100μmol/L)合用RSL3(2μmol/L)组，采用集落克隆实验检测细胞增殖能力、划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭与迁移能力。Western blot检测GPX4水平、C11 BODIPY 581/591荧光探针检测lipid活性氧(ROS)水平、FerroOrange荧光探针检测Fe2+水平。结果 RSL3呈浓度依赖性降低I-10/DDP细胞存活率，且在RSL3浓度2、4、8μmol/L时，合用甘珀酸后细胞存活率显著降低(P<0.05)；与Control组相比，RSL3处理后I-10/DDP细胞的集落形成数减少、划痕愈合率减小(P=0.012)、侵袭和迁移细胞数减少(P<0.001)；与单用RSL3相比，甘珀酸合用RSL3处理后I-10/DDP细胞的集落形成数显著减少、划痕愈合率显著减小(P=0.005)、侵袭和迁移细胞数显著减少(P=0.001,P=0.002)。Fer-1降低单用RSL3、甘珀酸合用RSL3对I-10/DDP细胞增殖的抑制率(P<0.01)；与Control组相比，RSL3作用后细胞内GPX4水平降低(P=0.001)、lipid ROS水平(P=0.001)和Fe2+水平升高；且与单用RSL3相比，甘珀酸合用RSL3处理后细胞内GPX4水平明显降低(P=0.01)、lipid ROS水平(P=0.001)和Fe2+水平明显升高。结论 RSL3可诱导耐顺铂睾丸癌细胞发生铁死亡，并能抑制细胞增殖、侵袭和迁移能力；甘珀酸通过促进RSL3诱导的铁死亡从而增强RSL3的抑制作用。

• 单位
  蚌埠医学院