二氢杨梅素通过促进AMPK活化抑制低氧诱导的H2c9心肌细胞凋亡

作者：王蕊^*; 张鹏祥; 李飞星; 石金铮; 郝翠君; 李会贤

来源：山西医科大学学报, 2020, 51(06): 512-517.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2020.06.008

• 二氢杨梅素
• 低氧
• 心肌细胞
• 磷酸腺苷活化蛋白激酶
• 细胞凋亡

目的研究二氢杨梅素(dihydromyricelin,DHM)对低氧诱导的H2c9心肌细胞凋亡的影响及其与磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)活性的关系。方法 H2c9细胞分为对照组(20%O2)、10%O2组、5%O2组和2.5%O2组,然后检测细胞活力和凋亡,观察低氧对H2c9细胞活力和凋亡的影响。H2c9细胞分为对照组(20%O2)、20%O2+40μmol/L DHM组、5%O2组、5%O2+20μmol/L DHM组、5%O2+40μmol/L DHM组和5%O2+80μmol/L DHM组,然后检测细胞活力和凋亡,观察二氢杨梅素对低氧诱导的H2c9细胞凋亡的拮抗作用。H2c9细胞分为20%O2(对照组)、5%O2组、5%O2+AICAR组、5%O2+DHM组、5%O2+Dorsomorphin组、5%O2+DHM+AICAR组、5%O2+DHM+Dorsomorphin组、5%O2+AICAR+Dorsomorphin组,然后检测AMPK和p-AMPK蛋白水平,观察DHM拮抗低氧诱导的H2c9细胞是否与AMPK活性有关。使用CCK-8检测H2c9细胞活力,AnnexinⅤ-FITC/PI双标记流式细胞仪检测H2c9细胞凋亡,蛋白质免疫印迹法检测H2c9细胞AMPK和p-AMPK蛋白水平。结果与20%O2组比较,5%O2组的H2c9细胞活力显著降低、细胞凋亡率明显增加(均P <0.05)。与5%O2组对比,5%O2+20μmol/L DHM组、5%O2+40μmol/L DHM组和5%O2+80μmol/L DHM组的H2c9细胞活力明显增加及凋亡率明显降低(均P <0.05)。与20%O2组比较,5%O2组H2c9细胞内的活性形式AMPK即磷酸化的AMPK(p-AMPK)蛋白水平显著降低(P <0.05)。与5%O2组比较,5%O2+AICAR组、5%O2+DHM组、5%O2+DHM+AICAR组中H2c9细胞中p-AMPK蛋白水平明显增加(均P <0.05),而5%O2+DHM+Dorsomorphin组和5%O2+AICAR+Dorsomorphin组中H2c9细胞中p-AMPK无明显增加。结论 DHM通过促进AMPK活化拮抗低氧诱导的AMPK活性下降,进而抑制低氧诱导的H2c9细胞凋亡。

• 单位
  河北北方学院附属第一医院