牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿辅助蛋白AP1基因的克隆及其表达产物的抗原性鉴定

作者：锡林高娃; 吴金花; 布日额; 刘洋; 王学理; 刘燕; 郭闯

来源：中国病原生物学杂志, 2013, (06): 481-484+488.

DOI：10.13350/j.cjpb.2013.06.005

• 菌毛岛屿
• AP1基因
• 克隆
• 抗原性 Pilus island
• AP1 gene
• clone
• antigenicity

目的克隆与高效表达无乳链球菌细胞表面菌毛岛屿辅助蛋白AP1基因编码蛋白抗原优势区,并进行抗原性分析及鉴定。方法根据GenBank上公布的牛乳腺炎无乳链球菌辅助蛋白AP1(EU929387.1)基因序列,利用生物信息学学软件Primer5.0和DNA MAN,根据其辅助蛋白保守序列设计、合成1对克隆引物,以分离于内蒙古东部地区乳源性无乳链球菌临床菌株总DNA为模板,PCR扩增辅助蛋白AP1基因序列,经克隆与测序后构建重组表达载体AP1-pET30,转化大肠埃希菌BL21,并进行高效表达,目的蛋白经亲和层析纯化后进行Western blot鉴定。结果克隆的抗原表位序列片段大小为714bp,编码23...

• 单位
  内蒙古民族大学