酶法制备黄嘌呤氧化酶抑制肽的工艺研究

作者：赵谋明; 蔡孟森; 王晓; 任娇艳

来源：第147场中国工程科技论坛——轻工科技发展论坛.

• 嘌呤抑制剂
• 氧化酶抑制肽
• 木瓜蛋白酶
• 酶解工艺

　　本研究选用木瓜蛋白酶、Alcalase和胰酶分别对几种不同的食源性蛋白(青蛙肉、红三鱼、草鱼、蓝圆碜)进行酶解，发现用木瓜蛋白酶水解红三鱼所得的酶解产物对黄嘌呤氧化酶(XOD)的半数抑制浓度(IC50)最小(3.21 mg/mL)，说明其对XOD的抑制作用最强。在此基础上进一步优化其酶解条件，测定不同酶底比、温度、酶解时间和pH值条件下红三鱼酶解产物对XOD的IC值，结果表明木瓜蛋白酶水解红三鱼的较优条件为酶底物浓度[E/S]0.20％、温度50℃、酶解时间5 h、pH7.0，此酶解条件下产物对XOD的半数抑制浓度最低(IC50=1，95 mg/mL)。利用DEAE-Sepharose离子交换柱层析对较该酶解液进行分离纯化，其中以0.1 mol·L-1 NaCl溶液洗脱得到的组分抑制活性最强(IC50=0.23 mg/mL)。通过高效液相色谱法测定该酶解产物的分子量分布结果可知，该酶解物中分子量＜1 000 Da的组分含量为12.44％；大于10 000 Da的片段仅占5.72％；而1 000～5 000Da的肽段组分含量最高，占52.72％，说明该酶解物以肽类组分为主。

• 单位
  华南理工大学