骨培养探讨脂多糖对小鼠骨骼发育及矿化的影响

作者：孙珂媛; 杨京; 谢杨丽; 徐伟; 王权; 杜晓兰; 陈林

来源：第三军医大学学报, 2016, 38(11): 1235-1239.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201602045

• LPS
• 骨培养
• 骨发育
• 骨矿化
• 小鼠

目的探讨体外培养情况下脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激对小鼠骨骼发育和矿化的影响及其机制。方法分离E18.5 d小鼠跖骨和胫骨,分为空白对照组(Blank组)及LPS组(10μg/m L LPS)。分别于培养后第1、7天照相,计算跖骨和胫骨全长增长率(TL-rate)、矿化带增长率(CZ-rate)、第7天矿化带占骨全长的比例(CZ%)。培养7 d后固定、石蜡包埋切片,臧红固绿和甲苯胺蓝染色观察肥大带宽度、Ⅱ型胶原(collagenⅡ,ColⅡ)、Ⅹ型胶原(collagenⅩ,ColⅩ)免疫组化染色观察软骨细胞分化及TUNEL染色观察软骨细胞凋亡变化。结果与Blank组比较,LPS处理后跖骨和胫骨TL-rate及CZ-rate明显降低(跖骨TL-rate P=0.025;跖骨CZ-rate P=0.019;胫骨TL-rate P=0.010;胫骨CZ-rate P=0.024)。臧红固绿、甲苯胺蓝染色及形态计量显示LPS组胫骨肥大带较Blank组明显变短(P<0.001)。与Blank组比较,LPS组胫骨的软骨分化相关蛋白ColⅡ、ColⅩ表达降低,软骨细胞凋亡明显增加。结论 LPS通过抑制软骨增生、分化及促进肥大带软骨细胞凋亡来抑制骨骼发育及矿化。

• 单位
  创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室