骨髓源性EPCs对脊髓源性NSCs增殖分化的影响

作者：张硕; 杜怡斌; 杜公文; 张辉; 余涛; 方家刘; 高维陆; 尹宗生

来源：安徽医科大学学报, 2015, 50(01): 20-24.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2015.01.006

• NSCs
• EPCs
• 增殖
• 分化
• 微环境
• 脊髓损伤

目的观察骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)对脊髓源性神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法通过密度梯度离心法获取骨髓血单个核细胞,以EBM-2进行诱导培养EPCs并进行免疫细胞化学染色鉴定,成熟的方法获取及鉴定SD大鼠的脊髓NSCs,1×105/ml第3代NSCs置于Transwell小室下层与1×105/ml上层原代EPCs进行体外1∶1共培养,以单纯第3代的NSCs培养为对照,培养7 d,双盲法分别计数各组在相差显微镜下神经球形成的数目,并用目镜测微尺测量神经球的平均直径,通过5%血清诱导培养NSCs7 d后,行β-微管蛋白-Ⅲ免疫荧光染色,Hoechst细胞核染色后在显微镜下计算神经元/细胞总数得出百分率。结果骨髓源性EPCs与脊髓源性NSCs共培养组神经球平均数目为(22.27±3.85)个,平均直径为(61.70±7.21)μm,诱导培养后分化为神经元的平均百分率为(46.10±3.70)%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论骨髓源性EPCs能促进脊髓源性NSCs增殖及其向神经元分化。

• 单位
  安徽医科大学第一附属医院; 安徽医科大学第四附属医院