RNA干扰抑制高迁移率族蛋白1表达对子宫内膜癌细胞株HEC-1A的增殖抑制作用及对细胞周期和细胞凋亡的影响

作者：祖木热来提·艾尼瓦尔; 热孜婉古丽·吾布力; 哈提古丽·尼斯尔^*

来源：临床和实验医学杂志, 2019, 18(17): 1831-1834.

• 子宫内膜癌
• 高迁移率族蛋白1
• HEC-1A细胞
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的探讨通过RNA干扰阻滞高迁移率族蛋白1(HMGB1)的表达水平对子宫内膜癌(EC)细胞株HEC-1A中的细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法将细胞分为以下三组:空白对照组(HEC-1A细胞未感染)、阴性对照组(HEC-1A细胞感染无关序列)、干预组(慢病毒转染HEC-1A细胞)。通过Western blot法对三组HEC-1A细胞中的HMGB1蛋白表达水平进行检测,并采用实时荧光定量PCR对HMGB1 mRNA相对表达量进行检测。采用MTT法对HEC-1A细胞增殖情况进行检测,用流式细胞术对HEC-1A细胞周期变化进行检测,同时用Annexin VFITC/PI法对HEC-1A细胞凋亡情况进行检测。采用Western blot法对转染HMGB1-siRNA后细胞cyclin D1、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)及磷酸化Akt(p Akt)蛋白表达进行检测。结果相比空白对照组与阴性对照组,干预组HEC-1A细胞中HMGB1蛋白表达水平显著下降(P <0. 01)。经实时荧光定量PCR检测结果可知相比空白对照组与阴性对照组,干预组HEC-1A细胞中HMGB1 mRNA相对表达量显著下降(P <0. 01)。相比空白对照组、阴性对照组,干预组cyclin D1和p Akt蛋白表达显著下降(P <0. 01);而三组Akt蛋白表达水平的比较,并无显著差异(P> 0. 05)。相比空白对照组、阴性对照组,干预组HEC-1A细胞在570 nm波长处的吸光度值显著下降(P <0. 01)。干预组HEC-1A细胞G0/G1期比率在整个细胞周期分布中的比率最高,其较空白对照组、阴性对照组显著升高(P <0. 01);干预组HEC-1A细胞S期比率、G2/M期比率较空白对照组、阴性对照组显著下降(P <0. 01)。干预组HEC-1A细胞凋亡比率较空白对照组、阴性对照组显著升高(P <0. 01)。结论 HMGB1表达降低可有效阻滞EC细胞株HEC-1A的增殖,使得细胞于G0/G1期受阻,同时可有效促进细胞凋亡,其作用机制可能在于降低cyclin D1蛋白表达和干扰磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路。

• 单位
  新疆维吾尔自治区人民医院