副溶血弧菌LacZ报告基因融合实验方法的建立与应用

作者：杜德燕; 张义全; 郭兆彪; 彭广能; 周冬生

来源：生物技术通讯, 2012, (04): 550-553.

• 副溶血弧菌
• LacZ报告基因
• 融合实验
• 调控子蛋白OpaR Vibrio parahaemolyticus
• LacZ reporter gene
• fusion assay
• regulator OpaR

目的:建立副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的LacZ报告基因融合实验方法。方法:PCR扩增靶基因的整个启动子区序列,并将其直接克隆入pHRP309质粒中,构建重组质粒;将重组质粒VPA1513转入VP野生株(WT)和opaR突变株(ΔopaR)中,而后通过比较两者β半乳糖苷酶活性的差异,确定OpaR对VPA1513的调控关系,以检验实验的稳定性。结果:构建出9个VP生物膜或毒力相关基因的LacZ重组质粒;OpaR对VPA1513的转录具有抑制作用。结论:建立了VP的LacZ报告基因融合实验方法,为后续转录调控机制的研究奠定了基础。

• 单位
  四川农业大学; 病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院