灵孢多糖对过氧化氢致SH-SY5Y细胞凋亡及线粒体功能障碍的调控

作者：李雁冰; 王记委; 刘晓琴; 郭敏芳; 牛晓洁; 孟涛; 苏琴; 王瀚斌; 杨立志; 马存根^*; 尉杰忠^*

来源：中国组织工程研究, 2024, 28(25): 4041-4047.

• 灵孢多糖
• SH-SY5Y细胞
• 细胞凋亡
• 线粒体功能障碍
• 氧化应激

背景：目前研究证实，灵孢多糖可促进神经退行性相关疾病的神经再生。神经退行性疾病的发生与线粒体功能失调密切相关，但灵孢多糖对神经退行性疾病的细胞凋亡及线粒体功能的调控作用尚不明确。目的：探索灵孢多糖对过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞凋亡及线粒体功能障碍的调控作用及机制。方法：SH-SY5Y细胞分为3组：对照组，过氧化氢组，灵孢多糖组。对照组细胞正常培养，过氧化氢组细胞用300μmol/L过氧化氢处理24 h，灵孢多糖组先用300μg/μL灵孢多糖干预一两个小时，然后加入300μmol/L过氧化氢干预24 h，干预结束后用JC-1试剂盒检测线粒体膜电位，TUNEL染色试剂盒检测细胞凋亡情况，丙二醛试剂盒和超氧化物歧化酶试剂盒检测丙二醛和超氧化物歧化酶活性，免疫荧光染色法和Western blot法检测凋亡、线粒体动力学相关蛋白的表达。结果与结论：(1)与对照组相比，过氧化氢组线粒体膜电位和超氧化歧化酶活性显著降低，细胞凋亡率、丙二醇水平显著增高，差异均有显著性意义(P <0.05)；与过氧化氢组相比，灵孢多糖组线粒体膜电位和超氧化歧化酶活性显著增高，细胞凋亡率、丙二醛水平显著下降，差异均有显著性意义(P <0.05)；(2)与对照组相比，过氧化氢组促凋亡蛋白Bax和Caspase-3的表达显著增加，抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著下降，差异均有显著性意义(P <0.05)；与过氧化氢组相比，灵孢多糖组促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达显著降低，抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著增加，差异均有显著性意义(P <0.05)；(3)与对照组相比，过氧化氢组线粒体分裂蛋白Fis1与线粒体动力学蛋白p-Drp1的表达均显著增高，线粒体融合蛋白OPA1、Mfn1、Mfn2的表达均显著降低，差异均有显著性意义(P <0.05)；与过氧化氢组相比，灵孢多糖组线粒体分裂蛋白Fis1与线粒体动力学蛋白p-Drp1的表达显著降低，线粒体融合蛋白OPA1、Mfn1、Mfn2的表达显著增高，差异均有显著性意义(P <0.05)；(4)以上结果证实，灵孢多糖可通过改善线粒体功能障碍以减轻过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激损伤和细胞凋亡。

• 单位
  国家中医药管理局; 大同市第五人民医院; 山西大同大学; 山西中医药大学