摘要
目的:研究α-生育酚对氧化应激状态下骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)的保护作用。方法:从4周龄大鼠体内提取原代BMSCs。CCK-8方法检测不同浓度的α-生育酚对过氧化氢(H2O2)刺激的BMSCs细胞活力的影响。ROS荧光探针、流式分析和Western Blot评估α-生育酚对H2O2刺激的BMSCs细胞内活性氧水平的影响。Western Blot、RT-PCR、ALP和茜素红染色分析α-生育酚对H2O2刺激的BMSCs成骨分化的影响。结果:CCK-8结果表明α-生育酚维持了H2O2刺激的BMSCs的细胞活力,α-生育酚浓度为10μmol/L时,BMSCs活性维持的最好。ROS荧光探针、流式分析和Western Blot结果提示α-生育酚浓度为10μmol/L时显著降低了H2O2刺激的BMSCs细胞内ROS的表达。Western Blot和RT-PCR证明了α-生育酚促进了H2O2刺激的BMSCs成骨相关蛋白(ALP、RUNX2)和mRNA(Alp、Opn、Runx2)的表达。ALP和茜素红染色进一步验证了α-生育酚促进了氧化应激状态下BMSCs的成骨分化性能。结论:α-生育酚能够降低H2O2刺激的BMSCs细胞内氧化应激水平,维持氧化应激状态下的BMSCs细胞活性并促进其成骨分化能力。
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