基于PI3K/Akt信号通路探讨固本解毒方含药血清对肺癌A549细胞上皮间质转化的影响

作者：朱冬菊; 朴炳奎; 秦腾腾; 杨晨; 白建琦; 朱宏伟; 张平

来源：中国实验方剂学杂志, 2022, 1-9.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221329

• 肺癌
• 固本解毒方
• 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路
• A549细胞
• 上皮间质转化

目的：观察固本解毒方对肺癌A549细胞上皮间质转化的影响，从磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路探讨其作用机制。方法：制备固本解毒方含药血清，噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率并筛选固本解毒方剂量用于后续实验。实验分为正常血清组、固本解毒方含药血清低、中、高剂量组（2.5%、5%、10%含药血清）、PI3K/Akt通路激活剂SC79组、高剂量+SC79组。划痕实验检测细胞迁移力，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化（p）-Akt、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、磷酸化（p）-GSK-3β蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应 (Real-time PCR) 检测N-cadherin、Vimentin mRNA表达。结果：（1）与正常血清组比较，固本解毒方含药血清（2.5%、5%、10%、20%、40%）组A549细胞活力降低（P<0.05），选择固本解毒方含药血清10%、5%、2.5%作为高、中、低剂量进行后续实验；（2）与正常血清组比较，固本解毒方含药血清高、中、低剂量组A549细胞迁移力降低；（3）Real-time PCR结果显示，与正常血清组比较，固本解毒方含药血清低、中、高剂量组A549细胞N-cadherin mRNA表达明显降低（P<0.01），Vimentin mRNA表达明显降低（P<0.01）；Western blot结果显示，（4）与正常血清组比较，固本解毒方含药血清低、中、高剂量组A549细胞E-cadherin蛋白表达明显升高（P<0.01），N-cadherin、Vimentin、p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达明显降低（P<0.01），p-Akt/Akt、p-GSK-3β/GSK-3β表达降低（P<0.05，P<0.01）；（5）与SC79组相比，固本解毒方高剂量组E-cadherin蛋白表达升高（P<0.01），N-cadherin、Vimentin、p-Akt、p-GSK-3β、p-Akt/Akt、p-GSK-3β/GSK-3β表达降低（P<0.01）；（6）与固本解毒方高剂量组比较，固本解毒方高剂量+SC79组E-cadherin蛋白表达明显降低（P<0.01），N-cadherin、Vimentin、p-A...

• 单位
  中国中医科学院望京医院; 中国中医科学院广安门医院