基于诺丽无菌苗的根进行细胞悬浮系建立的分析

作者：田婷^*; 吴田; 蓝增全^*

来源：分子植物育种, 2019, 17(14): 4748-4756.

DOI：10.13271/j.mpb.017.004748

• 诺丽
• 愈伤组织
• 抗褐化剂
• 次生代谢物质

以诺丽根为外植体进行细胞悬浮培养研究,以期获得稳定的细胞悬浮系。根愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L PVP,愈伤组织增殖培养基为MS+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L PVP。将疏松易碎的愈伤组织接种至液体培养基进行诺丽细胞悬浮培养,愈伤组织初始接种量为60 g/L时,细胞生长速率达到最大。细胞悬浮增长曲线大致呈"S"型,在0～4 d为停滞期,4～6 d进入对数生长期,6～10 d进入直线生长期,后缓慢生长在第12天细胞数量达到峰值12.5×103个/mL后,细胞数量下降。培养液pH初始值为5.8在第6天下降到4.62,随后在第10天～第12天上升至5.8,随后平稳下降。初代细胞多为长条形杆状细胞,随着继代次数的逐渐增加,细胞逐渐从杆状细胞变为圆形细胞团或单个的圆球形细胞。稳定的细胞悬浮培养液接种于MS+1.5 mg/L 6-BA培养基可再生愈伤组织。

• 单位
  西南林业大学