二氢杨梅素通过SIRT3调节2型糖尿病小鼠肠上皮屏障功能作用

作者：岳静; 周杰; 荆金金; 董妞; 刘明华; 易龙; 糜漫天^*

来源：陆军军医大学学报, 2023, 45(03): 192-201.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202209074

• 二氢杨梅素
• 2型糖尿病
• 肠上皮屏障
• SIRT3
• 紧密连接蛋白

目的 研究二氢杨梅素(dihydromyricetin, DHM)对高脂饮食(high-fat diet, HFD)诱导2型糖尿病小鼠肠上皮屏障功能的作用，并揭示SIRT3在介导DHM改善肠上皮屏障中的作用机制。方法 选用7周龄的SPF级雄性野生型(WT)小鼠18只和SIRT3敲除(SIRT3 KO)小鼠30只，分别按随机数字表法分为对照组(NC)、高脂组(HFD)、高脂加二氢杨梅素组(HFD+DHM),定期监测动物体质量、摄食量。干预12周，检测小鼠肠道通透性。小鼠处死后，检测血清生化指标和LPS水平及肠道组织病理学。利用分离的小鼠小肠上皮细胞和Caco-2细胞系，通过Western blot检测紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin)和qRT-PCR检测炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)表达。进一步利用慢病毒(LV-SIRT3)感染Caco-2细胞敲降SIRT3表达，DHM和LPS干预后检测相关炎症因子和紧密连接蛋白表达。结果 HFD诱导WT和SIRT3 KO小鼠体质量明显增加、糖脂代谢异常、肠道通透性增加、肠上皮结构改变(小肠隐窝深度和上皮绒毛长度减少)、肠上皮细胞紧密连接蛋白表达降低和炎症因子表达增加，且与WT小鼠相比，HFD诱导的SIRT3 KO小鼠相关指标改变具有统计学意义(P<0.05)。DHM干预后WT小鼠上述检测指标改善具有统计学意义(P<0.05),但DHM的作用在SIRT3 KO小鼠中不明显，差异无统计学意义(P>0.05)。体外实验发现，在LV-SIRT3感染的Caco-2细胞中，DHM对LPS诱导的炎症因子表达增加和紧密连接蛋白表达降低作用不明显，且差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SIRT3在DHM增加小肠上皮紧密连接蛋白表达、降低炎症因子表达、维持肠上皮屏障完整性和减少通透性、改善糖脂代谢和延缓T2DM发生中发挥重要作用。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 第三军医大学