人精子DNA从头甲基化转移酶及甲基CpG结合蛋白的mRNA表达分析

作者：刘特; 赖东梅; 程蔚蔚; 邹刚; 罗诚祖; 刘志学

来源：中国男科学杂志, 2008, 22(08): 5-9+15.

DOI：10.3969/j.issn.1008-0848.2008.08.002

• 精子
• DNA从头甲基化转移酶
• 甲基CpG结合蛋白2
• 实时荧光定量PCR Sperm
• de novo DNA Methyltransferase
• Methyl CpG Binding Protein 2
• qRealTime-PCR

目的通过体外分离成熟的精子,利用实时荧光定量PCR(qRealTime-PCR)检测其是否表达DNA从头甲基化转移酶(DNMT1/3a/3b)及甲基CpG结合蛋白(MeCP2),为精子中甲基化表观修饰研究提供依据。方法体外采集健康男性志愿者的精液标本,利用精子上游收集法获得具有活性的成熟精子。通过SYBR Green/PI双染色法,利用流式细胞术(FCM)检测精子样本的质膜完好性及其活性。抽提精子的总RNA,逆转录PCR获得cDNA,利用qRealTime-PCR鉴定精子甲基化转移酶及甲基CpG结合蛋白的mRNA表达情况。结果SYBR Green/PI双染色和流式细胞仪检测发现,利用上游收集法...

• 单位
  上海交通大学医学院附属仁济医院; 上海交通大学; 中心实验室; 同济大学