结缔组织生长因子基因RNA干扰复制缺陷型腺病毒载体的构建及鉴定

作者：郝春秋; 彭梅娟; 谢玉梅; 周云; 魏欣; 马力; 王素娜; 李瑞娟; 张岩; 白雪帆; 贾战生

来源：生物技术通讯, 2013, (01): 57-60.

• 结缔组织生长因子
• RNA干扰
• 腺病毒载体 connective tissue growth factor
• RNA interference
• adenovirus vector

目的:构建能介导结缔组织生长因子(CTGF)基因RNA干扰的复制缺陷型腺病毒表达载体。方法:以大鼠CTGF基因为靶序列,设计并合成含编码短发夹RNA序列的寡核苷酸,构建腺病毒穿梭质粒p-shuttle-CTGF,酶切及测序分析正确后,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转染AD-293细胞,进行病毒包装,得到腺病毒载体Ad.H1-CTGF,用该载体感染HSC-T6细胞,观察其对CTGF基因表达抑制的效果。结果:构建的腺病毒穿梭质粒p-shuttle-CTGF经酶切、测序分析证实正确;包装的病毒载体滴度为4×1010PFU/mL,感染HSC-T6细胞后,Western印迹证实CTGF表达显著减少...

• 单位
  第四军医大学