逆转录病毒介导的凋亡素基因诱导人结肠癌细胞Lovo的凋亡

作者：王娜; 朱惠明; 杨俊文; 黄勋

来源：肿瘤防治研究, 2010, (02): 146-149.

• 凋亡素
• 细胞凋亡
• 人结肠癌细胞Lovo Apoptin
• Apoptosis
• Human colonic carcinoma cell Lovo

目的构建强力霉素诱导型重组凋亡素基因逆转录病毒载体,观察强力霉素诱导凋亡素基因表达的情况及对人结肠癌细胞的影响。方法构建重组逆转录病毒表达载体pRevTRE-VP3。调节载体pRevTet-on和表达载体pRevTRE-VP3分别转染PT67包装细胞后,收集包装好的病毒依次感染人结肠癌细胞系Lovo,用抗生素筛选出抗性细胞株Lovo/on-vp3。通过向培养液中加入或去除强力霉素调控凋亡素基因在Lovo/on-vp3细胞中的表达,Annexin V-FITC/PI双染色后,以流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果经酶切和测序鉴定,重组逆转录病毒载体pRevTRE-VP3构建成功,并添加了kozak序列...

• 单位
  暨南大学; 深圳市人民医院