参芪益心方对缺氧复氧心肌细胞氧化应激和凋亡的作用机制

作者：卢曜嘉; 郑胜鹏; 马春明; 李中英

来源：中西医结合心脑血管病杂志, 2023, 21(16): 2967-2971.

• 缺氧复氧诱导的心肌细胞
• 参芪益心方
• 氧化应激
• 凋亡
• 钙离子
• 核因子κB信号通路
• 大鼠
• 实验研究

目的:探讨参芪益心方对缺氧复氧心肌细胞氧化应激、凋亡的调控及其潜在的机制。方法:应用SD大鼠制备含药血清。缺氧复氧处理制造损伤心肌细胞模型。设置心肌细胞为NC组、H/R组及给药组，采用不同浓度含药血清(3%、6%、9%)处理损伤心肌细胞，设置为低剂量组(L组)、中剂量组(M组)、高剂量组(H组)。细胞计数试剂盒(CCK8)检测细胞存活率；蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测细胞活化的半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)、Toll样受体家族成员4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)和NF-κB二聚体的抑制蛋白ɑ(I-κBɑ);流式细胞术检测细胞凋亡；酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量；免疫荧光法检测细胞活性氧(ROS)活性、细胞钙离子含量。结果:与NC组比较，H/R组细胞存活率、GSH-Px、SOD含量、I-κBɑ蛋白表达降低，Cleaved Caspase-3蛋白表达、凋亡率、LDH、ROS、MDA、钙离子含量及TLR4、NF-κB蛋白表达升高(P<0.05)。与H/R组比较，L组、M组、H组H/R组细胞存活率、GSH-Px、SOD含量、I-κBɑ蛋白表达升高，Cleaved Caspase-3蛋白表达、凋亡率、LDH、ROS、MDA、钙离子含量及TLR4、NF-κB蛋白表达降低，且呈浓度依赖性。结论:参芪益心方可抑制缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激和凋亡，其作用机制可能与维持钙稳态、抑制NF-κB信号通路活性有关。

• 单位
  湖北医药学院; 十堰市太和医院