大鼠髓核细胞原代培养及表型鉴定

作者：张涛; 贠喆; 蔡承魁; 马云雷; 姬振伟; 裘秀春; 范清宇; 钱济先

来源：现代生物医学进展, 2012, (03): 430-434.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2012.03.034

• 髓核细胞
• 原代培养
• HIF-1α
• MMP2
• Ⅱ型胶原 Nucleus pulposus cells
• Primary culture
• Hypoxia inducible factor-1α
• Matrix Metalloproteinases 2
• TypeⅡCollagen

目的:探讨Ⅱ型胶原酶联合透明质酸酶消化分离培养髓核细胞及免疫细胞化学表型鉴定的可行性。方法:无菌条件下分离SD大鼠凝胶状髓核,采用Ⅱ型胶原酶联合透明质酸酶消化分离髓核细胞并连续培养,倒置相差显微镜下观察,随后进行免疫细胞化学染色检测不同代次髓核细胞HIF-1、Ⅰ、Ⅱ型胶原、MMP2及蛋白聚糖的表达情况,并给予MTT法测定髓核细胞生长曲线。结果:Ⅱ型胶原酶联合透明质酸酶分离培养原代髓核细胞需要12 d左右贴壁,达95%融合需要34 d,而传代髓核细胞贴壁速率明显增快至10 h,且其倍增时间约为2.5 d;免疫细胞化学显示髓核细胞均表达HIF-1、Ⅰ、Ⅱ型胶原、MMP2和蛋白聚糖,且随着髓核细胞传...

• 单位
  第四军医大学