摘要
目的 探究前列腺素D2(ProstaglandinsD2,PGD2)对胃癌干细胞(gastriccancerstemcells,GCSCs)干性的影响及机制。方法:通过无血清培养法富集7901-GCSCs;然后通过流式细胞术检测无血清培养的7901-GCSCs干性标志物CD44的阳性率;通过干细胞成球实验检测不同浓度PGD2(2.5,5,10)μg/mL刺激后的成球能力,并采用Westernblot实验检测不同浓度PGD2刺激后干性相关指标(OCT4、CD44)和自噬相关蛋白(LC3、Beclin-1)的表达。采用Westernblot实验检测不同浓度CQ(2.5,5,10)μmol/L刺激后自噬相关蛋白的表达。通过Westernblot实验检测PGD2以及PGD2+CQ处理后自噬相关蛋白(LC3、Beclin-1)和干性相关指标(OCT4、CD44)的蛋白表达。结果 流式细胞术结果显示,与胃癌细胞SGC-7901相比,无血清培养的7901-GCSCs中CD44阳性率表达增加(P<0.05)。干细胞成球实验结果表明,与DMSO组相比,PGD2组中7901-GCSCs的成球能力明显减弱(P<0.05)。Westernblot结果显示,与DMSO组相比,PGD2组中7901-GCSCs的干性相关指标(OCT4、CD44)蛋白表达下调(P<0.05),而自噬相关蛋白(LC3、Beclin-1)表达增加(P<0.05)。与DMSO组相比,CQ组中自噬相关蛋白(LC3、Beclin-1)表达降低(P<0.05)。Westernblot结果还显示,与DMSO组相比,PGD2+CQ组中细胞自噬相关蛋白以及干性相关指标表达并无明显变化(ns:差异不显著),提示CQ可阻断PGD2对7901-GCSCs的干性抑制作用。结论 PGD2可能通过调控自噬影响7901-GCSCs的干性。
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