胚胎大鼠神经干细胞的冷冻及复苏

作者：付勇; 潘松; 刘强; 龚树生

来源：临床耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2010, 24(07): 311-314.

• 听觉丧失,感音神经性
• 神经干细胞
• 胚胎
• 冻存
• 复苏

目的:研究胚胎大鼠神经干细胞(NSCs)冻存复苏后的存活率及再培养生长情况,观察低温冻存对NSCs生物特性的影响。方法:含有10%BSA及7.5%DMSO的NSCs无血清培养液(不含神经生长因子)作为冻存液,将利用无血清培养液体外培养的原代、第3代、第6代胚胎大鼠NSCs进行冻存,于1周、4周、8周、12周、16周分别复苏,计数活细胞比例并进行再培养、分化鉴定。结果:不同的细胞代数,不同的冻存时间对复苏后的细胞存活率都无明显影响。复苏后NSCs的存活率均达到60%～70%,并能分化为神经元和星型胶质细胞。结论:本实验成功地对胚胎大鼠NSCs进行了冻存复苏及再培养,为择期应用NSCs耳蜗内移植治疗感音神经性聋的实验研究奠定了基础。

• 单位
  咸宁学院; 浙江大学医学院附属第一医院; 首都医科大学附属北京同仁医院; 老河口市妇幼保健院