N~(pro)蛋白可抑制poly(I:C)和流感病毒激活的天然免疫应答(英文)

作者：施文豪; 蔡彬祥; 杨彬偲; 邱昊日; 文法鑫; 池晓娟; 王松; 陈玉海; 廖源; 陈叶; 陈吉龙; 马树杰

来源：微生物学报, 2022, 62(12): 1-23.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20220212

• 猪瘟病毒
• 甲型流感病毒
• N~(pro)
• 天然免疫
• 干扰素
• STAT1

【目的】猪瘟病毒(classicalswinefevervirus，CSFV)感染猪引起出血综合征和免疫抑制，是一种高度传染性的猪病。本课题以CSFV为研究对象，探究CSFV抑制宿主天然免疫的机制及其在免疫抑制条件下对甲型流感病毒(influenzaAvirus，IAV)感染的潜在作用。【方法】首先，为探究CSFV对宿主天然免疫的影响，利用反转录PCR(RT-PCR)、荧光定量PCR(RT-qPCR)和Westernblotting技术检测PK-15细胞感染CSFV后对Poly(I:C)诱导干扰素(IFNs)、干扰素诱导基因(ISGs)和信号传导子和转录活化子1(STAT1)磷酸化的影响。其次，利用过表达CSFV蛋白的细胞系筛选并确定抑制天然免疫的关键蛋白。最后，在过表达CSFVN~(pro)蛋白的细胞系上，利用RT-PCR、RT-qPCR、westernblotting和病毒噬斑实验技术研究N~(pro)蛋白对天然免疫和IAV感染的影响。【结果】CSFV可抑制poly(I:C)诱导的I型和III型IFN的表达。CSFV N~(pro)蛋白在体外直接抑制STAT1的磷酸化，引起寡腺苷酸合成酶样蛋白(OASL)、2'，5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)、干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)和干扰素刺激基因15(ISG15)表达下调。重要的是，CSFV N~(pro)蛋白可抑制IAV诱导的I型和III型IFN的表达，并导致STAT1的磷酸化和OASL、OAS1、IFITM3和ISG15的表达显著下降，进而显著促进IAV在过表达N~(pro)蛋白的PK-15细胞中复制。【结论】猪瘟病毒的N~(pro)蛋白能够拮抗由poly(I:C)和IAV所激活的天然免疫应答，表明N~(pro)蛋白可抑制RIG-I依赖的信号通路并可促进IAV在表达N~(pro)蛋白的PK15细胞中复制。

• 单位
  动物科学学院; 福建农林大学; 中国科学院微生物研究所