细胞溶酶体降解A型流感病毒HA蛋白的机制研究

作者：姚晓雨; 王斌; 刘宇婷; 张晶; 刘鑫; 郑永辉^*

来源：中国预防兽医学报, 2019, 41(10): 993-998.

DOI：10.3969/j.issn.1008-0589.201903045

• 流感病毒
• HA蛋白
• 溶酶体
• 降解
• 凝集

为研究A型流感病毒HA蛋白在宿主细胞内的降解通路及其机制,本研究首先将表达流感病毒H5亚型HA蛋白的重组质粒和内质网应激通路相关分子XBP1共转染293T细胞,通过检测荧光素酶活性分析HA蛋白引起细胞的内质网应激水平。结果显示HA蛋白在细胞内的表达能够引起内质网应激。进一步进行药物抑制试验,结果显示部分HA蛋白通过溶酶体进行降解。采用RNA干扰、ELISA、药物处理等相关试验对溶酶体降解的3条途径逐一分析,结果显示HA蛋白未通过分子伴侣介导的自噬途径、内吞途径以及巨自噬途径降解。利用表达细胞凝集结构标志蛋白与表达HA蛋白的重组质粒共转染293T细胞,通过观察并经荧光定量,发现HA蛋白在细胞内过表达时发生凝集,随后通过溶酶体降解。本研究结果表明HA蛋白在宿主细胞内错误折叠并诱发内质网应激,错误折叠的蛋白形成凝集结构后通过溶酶体降解。本研究结果初步阐明了HA蛋白通过溶酶体降解的机制,为开发新的抗病毒手段奠定了基础。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院上海兽医研究所; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所