Bacillus sphaericus DS11蛋白酶基因osp在Bacillus subtilis的异源表达及酶学性质研究

作者：柴金龙; 胡晟源; 陈丽; 王淑军; 焦豫良; 杨杰; 刘姝^*; 房耀维^*

来源：食品研究与开发, 2020, 41(12): 8-13.

• Bacillus sphaericus DS11
• 蛋白酶
• 异源表达
• 有机溶剂稳定性
• 酶学性质

将Bacillus sphaericus 2297蛋白酶基因osp在Bacillus subtilis WB800异源表达,并进行纯化和酶学性质研究。以Bacillus sphaericus DS11基因组DNA为模板,扩增osp基因,构建重组质粒pMA0911-His6-osp,重组质粒转化Bacillus subtilis WB800获得重组表达菌株Bacillus subtilis WB800-pMA0911-His6-osp。利用镍离子柱亲和层析纯化重组酶至电泳纯。重组酶最适催化温度和pH值分别为40℃和pH 8.0,在20℃～30℃下保温10 h保持80%以上酶活力,在pH 7.0～9.0处理24 h保持60%以上酶活力;Sr2+、K+、Mg2+对酶活有促进作用,Fe3+、Ba2+、Ca2+对酶活有抑制作用;重组蛋白酶在极性常数为0.8～3.1的有机溶剂中孵育6 d后保持53%以上的酶活力。

• 单位
  江苏省海洋资源开发研究院