扬子鳄Mx基因的原核表达和纯化及其多克隆抗体的制备

作者：苏玉鑫; 费荣梅^*

来源：中国兽医科学, 2020, 50(04): 467-472.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0066

• Mx
• 扬子鳄
• 原核表达
• 蛋白纯化
• 多克隆抗体

扬子鳄Mx以蛋白质的形式发挥其抗病毒功能,本试验通过构建pET28a-Mx质粒,将其转化入大肠杆菌感受态细胞中,用IPTG诱导其进行蛋白大量表达,并纯化蛋白。将纯化好的蛋白作为抗原,与弗氏佐剂充分乳化,免疫6周龄的BALB/c雌性小鼠,4次免疫后提取其血清,测定效价。应用Western-blot检测制备的鼠抗扬子鳄Mx多克隆抗体的特异性。结果显示,扬子鳄Mx蛋白原核表达载体构建成功,并且应用切胶纯化的方式成功纯化了该蛋白。制备的鼠抗扬子鳄Mx多克隆抗体的效价达1∶51 200以上。本试验研究结果为进一步研究扬子鳄Mx蛋白的抗病毒功能提供了物质条件。

• 单位
  南京农业大学