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摘要
目的 探讨SIRT1靶向FOXO1/Rab7自噬通路调节胆管癌细胞5-氟尿嘧啶（5-FU）耐药的机制。方法 不同浓度（50、100、150、200μg/mL）的5-FU处理HCCC-9810细胞构建HCCC-9810/5-FU耐药细胞模型，免疫荧光检测细胞中SIRT1表达情况，Western blot和q-PCR检测SIRT1、FOXO1、Rab7表达水平，Western blot检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达水平。SIRT1siRNA和NC si RNA转染HCCC-9810/5-FU耐药细胞，CCK-8检测细胞耐药性，划痕实验检测细胞迁移能力，RT-qPCR检测FOXO1、Rab7 mRNA水平，Western blot检测SIRT1、FOXO1、Rab7、Beclin1、LC3、p62蛋白表达水平。结果 不同浓度（50、100、150、200μg/mL）的5-FU均能抑制HCCC-9810细胞增殖。与对照组相比，HCCC-9810/5-FU耐药细胞中SIRT1荧光强度略有增强；SIRT1、Rab7、p62、FOXO1和Beclin 1蛋白表达上调（P<0.01）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增加（P<0.001）;SIRT1、Rab7和FOXO1mRNA水平上调（P<0.05）。沉默SIRT1表达后，HCCC-9810细胞的5-FU耐药性降低，细胞迁移能力降低，SIRT1(P<0.01)、Rab7(P<0.05)、p62(P<0.05)、FOXO1(P<0.01)和Beclin1(P<0.001)蛋白表达降低，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低（P<0.001）;FOXO1和Rab7 mRNA水平降低（P<0.05）。结论 沉默SIRT1的表达抑制FOXO1/Rab7自噬通路激活。
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